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LabAssay™ Phospholipid
LabAssay™ 磷脂检测试剂盒

LabAssay™ Phospholipid

LabAssay™ 磷脂检测试剂盒wako


  

磷脂连同糖蛋白、胆固醇和蛋白是生物膜的主要组成成分,与脂肪的乳化、吸收和血液凝固等重要功能密切相关。本产品是基于N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3'5-二甲氧基苯胺钠盐(DAOS)的蓝色显色酶法试剂。通过微孔板法检测小鼠血清中的磷脂含量。

 


检测原理


样品中的磷脂(卵磷脂、溶血卵磷脂、鞘磷脂)在磷酸酶D的作用下水解,释放出胆碱。游离胆碱在胆碱氧化酶的作用下被氧化成甜菜碱,同时生成过氧化氢。产生的过氧化氢在过氧化物酶 (POD) 的作用下定量氧化缩合 DAOS 和 4-氨基安替比林,生成蓝色染料。通过检测蓝色染料的吸光度,计算得到样品中磷脂的浓度。

 


◆产品性能


标准曲线范围:75.0~596.1 mg/dL

检测时间:约 10 min

检测样品:血清、血浆(小鼠、大鼠、人)

所需样品量:2 μL

检测波长:主波长 505 nm,副波长 600 nm

 


◆试剂盒组成


缓冲液:50 mL ×3瓶

显色剂:50 mL 用×3瓶

标准溶液:5 mL ×1瓶

 


◆标准曲线示例

 


◆检测操作方法


微孔板法


根据下表中的条件,进行反应。



Test

标准

空白

显色试剂

300 μL

300 μL

300 μL

待测物

血清 2 μL

标准溶液 2 μL

——


充分混合,37°C下加热 5 min。

以空白为对照,在600 nm*2 处检测样品以及标准溶液的吸光度。


*2 双波长检测时,主波长 600 nm / 副波长 700 nm。



◆加标回收测试


人样品


人样品

添加量(mg/dL)

检测值(mg/dL)

回收量(mg/dL)

回收率(%)

血清样品

0

216.6



152.4

361.6

145

95.20%

204.2

412.4

195.8

95.90%

262.3

462.8

246.2

93.90%

314.2

521.9

305.3

97.10%

血浆(EDTA)样品

0

216.5



152.4

359.7

143.2

94.00%

204.2

403.5

187

91.60%

262.3

466.6

250.1

95.30%

314.2

533.5

317

100.90%



小鼠样品


小鼠样品

添加量(mg/dL)

检测值(mg/dL)

回收量(mg/dL)

回收率(%)

血清样品

0

285.3



152.4

438.1

152.8

100.20%

204.2

486.6

201.3

98.60%

262.3

532

246.7

94.00%

314.2

601.3

316

100.60%

血浆(EDTA)样品

0

111.5



152.4

256.5

145

95.10%

204.2

311.2

199.7

97.80%

262.3

368.5

257

98.00%

314.2

432.7

321.1

102.20%



大鼠样品


大鼠样品

添加量(mg/dL)

检测值(mg/dL)

回收量(mg/dL)

回收率(%)

血清样品

0

138.1



152.4

291

152.9

100.30%

204.2

345.1

207

101.40%

262.3

395.4

257.3

98.10%

314.2

459.7

321.6

102.30%

血浆(EDTA)样品

0

97.8



152.4

246.3

148.5

97.40%

204.2

298.6

200.8

98.30%

262.3

352.3

254.5

97.00%

314.2

422.5

324.7

103.30%



◆样品检测案例


人血清样品



检测值(mg/dL)

mean

SD

CV(%)

人血清

240

223.9

231.9

11.4

4.9

人血浆(EDTA)

211

212.6

211.8

1.1

0.5



正常CD-1(ICR)雄性小鼠血清(稀释20%)


No.

检测值(mg/dL)

mean

SD

CV(%)

1

242.1

239.8

241

1.6

0.7

2

213.6

214.2

213.9

0.44

0.2

3

185.5

180.8

183.1

3.3

1.8

4

201.5

194.7

198.1

4.86

2.5

5

166.8

175.3

171

5.97

3.5



正常CD-1(ICR)雄性小鼠血浆(K2EDTA)


No.

检测值(mg/dL)

mean

SD

CV(%)

1

108.2

114.5

111.4

4.45

4

2

124.1

121.8

122.9

1.61

1.3

3

107

99.7

103.4

5.15

5

4

120.2

109.7

115

7.41

6.4

5

134.4

135.2

134.8

0.58

0.4



正常 Sprague Dawley 雄性大鼠血清(稀释10%)


No.

检测值(mg/dL)

mean

SD

CV(%)

1

137.6

131.5

134.6

4.28

3.2

2

201.3

197.3

199.3

2.88

1.4

3

167.3

169.6

168.5

1.62

1

4

159.7

160.2

160

0.33

0.2

5

166

161.1

163.5

3.52

2.2



正常 Sprague Dawley 雄性大鼠血浆(K2EDTA)


No.

检测值(mg/dL)

mean

SD

CV(%)

1

99

96.4

97.7

1.84

1.9

2

126.9

118.7

122.8

5.82

4.7

3

109.5

106.2

107.9

2.35

2.2

4

121.3

110.7

116

7.5

6.5

5

129.3

113.9

121.6

10.9

8.9



正常雄性比格犬血清


No.

检测值(mg/dL)

mean

SD

CV(%)

年龄

1

365.7

381

373.3

7.64

2

4

2

283.8

264.4

274.1

9.74

3.6

6

3

375.1

334.2

354.6

20.49

5.8

6

4

287.5

288

287.8

0.26

0.1

11

5

459.9

484.8

472.3

12.47

2.6

12

6

300.2

306.3

303.3

3.06

1

6

7

271.8

278.4

275.1

3.34

1.2

10

8

276.4

279.3

277.8

1.46

0.5

4



正常雄性比格犬血浆(EDTA)


No.

检测值(mg/dL)

mean

SD

CV(%)

年龄

1

340.4

316.2

328.3

12.11

3.7

4

2

321.5

345.1

333.3

11.76

3.5

6

3

351.1

374.4

362.8

11.69

3.2

10

4

322.8

327

324.9

2.1

0.6

12

5

337.4

364

350.7

13.27

3.8

6

6

303.3

316.7

310

6.72

2.2

11

7

318.9

321.5

320.2

1.31

0.4

10

8

310.7

306

308.4

2.35

0.8

12



正常雄性短毛猫血清


No.

检测值(mg/dL)

mean

SD

CV(%)

年龄

1

244.8

246.4

245.6

0.8

0.3

3

2

193.7

188.3

191

2.69

1.4

3

3

236.3

240.1

238.2

1.89

0.8

6

4

229.7

229.9

229.8

0.13

0.1

4

5

226.7

227.4

227

0.38

0.2

6

6

239.8

236.2

238

1.8

0.8

6

7

305.3

299.4

302.3

2.93

1

1

8

159.6

157.6

158.6

0.98

0.6

1



正常雄性短毛猫血浆(EDTA)


No.

检测值(mg/dL)

mean

SD

CV(%)

年龄

1

214.5

212

213.3

1.24

0.6

0.5

2

114.9

116.9

115.9

0.98

0.8

1

3

199.8

194.8

197.3

2.52

1.3

3

4

180.9

184.6

182.8

1.85

1

0.5

5

195.6

201.5

198.5

2.94

1.5

3

6

143.7

139.3

141.5

2.21

1.6

3

7

168.2

166.3

167.2

0.92

0.5

0.5

8

183.7

178.2

181

2.73

1.5

1




◆稀释线性度测试



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※ 产品已更新,旧编号为:296-63801

参考文献


1.

Xu, Q. et al. : Biosci. Biotechnol, Biochem., 77, 1390 (2013). Medium-Chain Fatty Acids Enhanced the Excretion of Fecal Cholesterol and Cholic Acid in C57BL/6J Mice Fed a Cholesterol-Rich Diet ※小鼠肝脏粉碎液


2.

Tatematsu, Y. et al. : Biol. Pharma. Bull.41, 319 (2018). Effects of the Nonsteroidal Anti-inflammatory Drug Celecoxib on Mitochondrial Function ※脂质体


3.

Kuge, H. et al. : J. Biol. Chem.289, 26783 (2014). Functional Compartmentalization of the Plasma Membrane of Neurons by a Unique Acyl Chain Composition of Phospholipids ※脂质体


4.

Kessler, E. C. et al. : J. Dairy. Sci.97, 5481 (2014). Cholesterol metabolism, transport, and hepatic regulation in dairy cows during transition and early lactation ※牛血浆


5.

Cheng, L. et al. : Transplantation90, 127 (2010). Role of Cholangiocyte Bile Acid Transporters in Large Bile Duct Injury After Rat Liver Transplantation ※大鼠




产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
639-51001 LabAssay™ Phospholipid
LabAssay™ 磷脂检测试剂盒
500 tests for Cellbiology -

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